細胞培養過(guò)程中無菌操作的基本技術(shù) 

1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作台(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鍾滅菌，以70% ethanol 擦拭無菌操作擡面，並開啓無菌操作台風扇運轉10 分鍾後
，才開始實驗操作。每次操作隻處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢後，将實驗物品帶出工作台，以70% ethanol 擦拭無菌操作擡面。操作間隔應讓無菌操作台運轉10 分鍾以上後，再進行下一個細胞株之操作。 

2. 無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品
，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利於氣流之流通
。實驗用品以70% ethanol 擦拭後才帶入無菌操作台内。實驗操作應在擡面之中央無菌區域，勿在邊緣之非無菌區域操作。 

3. 小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開後，以手夾住瓶蓋並握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿将瓶蓋蓋口朝上放置桌面。 

4. 工作人員應注意自身之安全，須穿戴實驗衣及手套後才進行實驗
。對於來自人類或是病毒感染之細胞株應特别小心操作，並選擇适當等級之無菌操作台(至少Class II)。操作過程中，應避免引起aerosol 之産生，小心毒性藥品，例如DMSO 及TPA 等，並避免尖銳針頭之傷害等。 

5. 定期檢測下列項目： 5.1. CO2 鋼瓶之CO2 壓力 5.2. CO2 培養箱之CO2 濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水，每周更換)。 5.3. 無菌操作台内之airflow 壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜，預濾網(300小時/預濾網，3000 小時/HEPA)。 

6. 水槽可添加消毒劑(Zephrin 1:750)，定期更換水槽的水。